beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β₁-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400660

概要

ADRB1はヒトのβ1アドレナリン受容体（β1-AR）をコードしており、主にGsと共役するGタンパク質共役受容体（GPCR）です。これによりアデニル酸シクラーゼが刺激され、cAMPが増加し、PKA依存的なリン酸化プログラムが活性化します。β1-ARシグナルは心拍数（クロノトロピー）と心収縮力（イノトロピー）を調節し、カルシウム動態や収縮装置にも影響を及ぼします。また、受容体の脱感作や下流の転写応答を形作るMAPK/ERK経路およびGRK–βアレスチン経路とも統合されています。さらに、心筋細胞に加えて、ADRB1活性は交感神経由来のカテコールアミン入力を介して、複数の組織における代謝およびストレス応答シグナルも調節します。ADRB1の遺伝的・機能的変異やβ1-ARシグナルの破綻は、心血管系の表現型や、心リモデリングおよびアドレナリン作動性過剰刺激モデルにおける反応性の変化と関連づけられています。

beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADRB1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADRB1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADRB1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-ARタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-ARシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADRB1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-ARの機能に不可欠なADRB1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADRB1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびbeta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADRB1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR HDRプラスミド（h）および beta 1 Adrenergic Receptor/ADRB1/β1-AR HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADRB1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADRB1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。