BDP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422508

Visão geral

Ptpn18 codifica uma fosfatase de tirosina proteica implicada na regulação da sinalização de receptores tirosina-quinase e de vias a jusante dependentes de fosforilação, que moldam o crescimento, a adesão e a motilidade celulares. Em células de camundongo, a PTPN18 tem sido associada à modulação da sinalização do EGFR/família ErbB e a processos de tráfego de proteínas que influenciam a duração do sinal e sua organização espacial. Por meio da desfosforilação de substratos específicos, a PTPN18 pode afetar desfechos ligados às vias MAPK e PI3K, integrando sinais que impactam a dinâmica do citoesqueleto e as respostas celulares ao estresse. A atividade desregulada de fosfatases e a sinalização alterada de RTKs são amplamente associadas a programas de sinalização oncogênicos e a fenótipos inflamatórios, tornando o Ptpn18 um alvo útil para estudos mecanísticos em modelos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BDP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ptpn18 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ptpn18, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ptpn18 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BDP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ptpn18 para a investigação da sinalização de BDP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ptpn18 críticos para a função BDP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ptpn18 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo BDP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo BDP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ptpn18. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo BDP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR BDP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ptpn18 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ptpn18 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.