BCMA CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423440

概要

Tnfrsf17は、主に形質細胞および後期段階のB細胞に発現するTNF受容体スーパーファミリーの一員であるB細胞成熟抗原（BCMA）をコードします。BCMAはAPRILおよびBAFFと結合し、カノニカル／ノンカノニカルNF-κB、MAPK、PI3K/AKTシグナル伝達を活性化することで、形質細胞の生存、免疫グロブリン分泌、ならびに体液性免疫の維持を促進します。マウスモデルでは、BCMA依存的なシグナルがB細胞分化と抗体応答を制御し、Tnfrsf17が免疫恒常性や炎症に伴う組織病変と関連することが示されています。BCMAシグナルの破綻や形質細胞の増殖は、自己免疫様表現型やB細胞系列の制御異常を研究する際の分子学的指標として広く用いられています。

BCMA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるTnfrsf17遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Tnfrsf17内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Tnfrsf17のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BCMAタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BCMAシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Tnfrsf17欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BCMAの機能に不可欠なTnfrsf17エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Tnfrsf17ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BCMA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBCMA CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Tnfrsf17遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BCMA HDRプラスミド（m）および BCMA HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTnfrsf17ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTnfrsf17標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。