Bcl-9L Double Nickase Plasmid (h2): sc-415290-NIC-2
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Bcl-9L Double Nickase Plasmid (h2) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Bcl-9L Double-Nickase-Plasmid (h2) und Bcl-9L Double-Nickase-Plasmid (h22) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf BCL9L abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Bcl-9L Double Nickase Plasmid (h2) | sc-415290-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen BCL9L kodiert Bcl-9L, einen transkriptionellen Koaktivator, der β‑Catenin bindet und mit TCF/LEF-Faktoren zusammenwirkt, um die kanonische Wnt-Signalübertragung und nachgelagerte Genexpressionsprogramme zu verstärken, die Proliferation, Differenzierung und die epitheliale Homöostase steuern. Über seine Interaktionen mit nukleären Transkriptionskomplexen und chromatinassoziierten Regulatoren trägt Bcl-9L dazu bei, eine kontextabhängige Auswahl von Wnt-Zielgenen zu formen, und beeinflusst Prozesse wie Zellschicksalsfestlegung, Migration und stammzellähnliche Eigenschaften. Eine Fehlregulation der BCL9L-abhängigen β‑Catenin-vermittelten Transkriptionsaktivität wurde mit einer aberranten Wnt-Signalweg-Ausgabe in Verbindung gebracht, wie sie bei mehreren Krebserkrankungen und Entwicklungsstörungen beobachtet wird. Die Geneditierung von BCL9L unterstützt mechanistische Studien zur Wnt/β‑Catenin-Transkription, die Kartierung von Protein‑Protein‑Interaktionsabhängigkeiten sowie funktionelle Genomik-Screens, um Signalweg-Crosstalk und onkogene Transkriptionsnetzwerke in menschlichen Zellen zu untersuchen.
Bcl-9L Das Double-Nickase-Plasmid (h2) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des BCL9L-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von BCL9L abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die BCL9L-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit BCL9L-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.