BCAS2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426956

概要

Bcas2はBCAS2をコードしており、BCAS2は進化的に保存されたPrp19関連スプライソソーム複合体の構成要素として、pre-mRNAスプライシングおよびスプライス部位選択を支えるタンパク質です。BCAS2は転写制御やゲノム維持に関わる経路とも相互作用し、チェックポイントやDNA損傷応答シグナルの調節を介して細胞周期の進行にも関与することが示されています。マウスの系では、BCAS2を攪乱すると、選択的スプライシングのプログラムや、それに続く下流の遺伝子発現ネットワークが変化し、増殖・分化・ストレス応答に影響を及ぼし得ます。BCAS2の発現異常、あるいはBCAS2関連複合体に関わるスプライシング異常は、異常なRNAプロセシングが病態に寄与する腫瘍生物学やその他の疾患の文脈で研究されています。

BCAS2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるBcas2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Bcas2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Bcas2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BCAS2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BCAS2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Bcas2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BCAS2の機能に不可欠なBcas2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Bcas2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BCAS2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBCAS2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Bcas2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BCAS2 HDRプラスミド（m）および BCAS2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBcas2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBcas2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。