BAALC CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405852

概要

BAALC（brain and acute leukemia, cytoplasmic）は、造血系および神経発生の文脈で豊富に発現する細胞質タンパク質をコードしており、増殖や分化といった側面を含む前駆細胞状態の制御に関与すると考えられています。骨髄系系統では、BAALC発現は未熟な転写プログラムやシグナル出力の変化を反映する分子指標としてしばしば用いられ、細胞周期の進行、生存、系統決定を形作る経路と交差します。BAALCの発現レベルの異常は急性白血病と関連づけられており、白血病化や疾患の不均一性に結び付く広範な遺伝子発現ネットワークの一部として研究されています。これらの特性により、BAALCはヒト細胞モデルにおける幹／前駆細胞の維持機構や、異常な造血シグナル伝達を解明するための有用な結節点となります。

BAALC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるBAALC遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、BAALC内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、BAALCのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BAALCタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BAALCシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、BAALC欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BAALCの機能に不可欠なBAALCエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、BAALCゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BAALC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびBAALC CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、BAALC遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BAALC HDRプラスミド（h）および BAALC HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBAALCホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBAALC標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。