Plásmido Doble Nickase (h) atrophin-1: sc-407398-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)atrophin-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa atrophin-1 (h) y el plásmido de doble nickasa atrophin-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ATN1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: atrophin-1 Anticuerpo (C1): sc-517594
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) atrophin-1 | sc-407398-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) atrophin-1 | sc-407398-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El ATN1 humano codifica atrofina-1, un corregulador nuclear de la transcripción que se asocia con factores de unión al ADN para modular programas de expresión génica implicados en el desarrollo neuronal, la diferenciación y la represión dependiente de la cromatina. La atrofina-1 participa en redes transcripcionales vinculadas a la señalización relacionada con Notch y al control epigenético del destino neuronal, influyendo en estados regulatorios específicos de tipo celular en el sistema nervioso central. La expansión de poliglutaminas en la atrofina-1 se asocia con la atrofia dentatorrubro-palidoluisiana (DRPLA), lo que respalda su relevancia para estudios de neurodegeneración, homeostasis proteica y desregulación transcripcional. Por ello, la alteración de ATN1 se utiliza ampliamente para investigar mecanismos de vulnerabilidad neuronal selectiva y los circuitos de regulación génica en modelos celulares humanos.
atrophin-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ATN1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ATN1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ATN1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ATN1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.