Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ATGL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426224
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATGL O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ATGL, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ATGL Anticorpo (F-7): sc-365278
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATGL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426224 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Pnpla2 de camundongo codifica a lipase de triglicerídeos do tecido adiposo (ATGL), uma enzima-chave limitante da velocidade que inicia a hidrólise citosólica de triglicerídeos para gerar diacilglicerol e ácidos graxos livres destinados à β-oxidação mitocondrial e à sinalização lipídica. A atividade da ATGL coordena a lipólise com a homeostase energética e se integra à dinâmica de renovação das gotículas lipídicas, a programas transcricionais mediados por PPAR e a vias metabólicas responsivas à insulina. A perturbação da lipólise dependente de ATGL altera o armazenamento lipídico celular e o fluxo de ácidos graxos, associando o Pnpla2 à desregulação do metabolismo de lipídios e a respostas ao estresse em tecidos metabolicamente ativos. Essas características fazem da ATGL um alvo amplamente utilizado em estudos mecanísticos de biologia de gotículas lipídicas, sensoriamento de nutrientes e remodelamento metabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ATGL (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pnpla2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pnpla2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pnpla2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ATGL.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pnpla2 para a investigação da sinalização de ATGL, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pnpla2 críticos para a função ATGL
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pnpla2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ATGL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ATGL Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pnpla2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ATGL Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ATGL (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pnpla2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pnpla2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.