ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400429

概要

ASGR1はアシアロ糖タンパク質受容体1（ASGPR1）をコードしており、肝細胞に高発現するCa²⁺依存性レクチンです。ASGPR1は細胞膜上でアシアロ糖タンパク質受容体複合体を形成し、脱シアル化糖タンパク質のクラスリン依存性エンドサイトーシスを媒介します。末端のガラクトースまたはN-アセチルガラクトサミン残基に結合することで、ASGPR1は循環中の糖タンパク質の肝クリアランスに寄与し、受容体のリサイクリングやリソソームへの輸送経路にも影響します。この受容体–リガンド系は、肝臓特異的取り込み機構や糖タンパク質の品質管理を研究するためのモデルとして広く用いられています。ASGPR1の発現や機能の変化は、代謝性および炎症性の肝状態との関連で検討されており、肝細胞表面受容体の制御やエンドサイトーシス能力の解析にも重要です。

ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるASGR1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ASGR1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ASGR1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ASGR1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1の機能に不可欠なASGR1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ASGR1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ASGR1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 HDRプラスミド（h）および ASGPR1/Asialoglycoprotein Receptor 1/ASGR1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはASGR1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のASGR1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。