ASCC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417767

Visão geral

ASCC1 (subunidade 1 do complexo ativador do cointegrador de sinal 1) é um fator nuclear implicado na regulação da transcrição e na manutenção do genoma, atuando no complexo coativador ASC-1/ASCC, que faz interface com a expressão gênica dependente da RNA polimerase II. O ASCC1 tem sido associado a respostas celulares ao estresse genotóxico e à coordenação de processos ligados ao reparo de DNA, contribuindo para a progressão adequada do ciclo celular e para a proteostase em condições de estresse. A disrupção da função de ASCC1 tem sido associada a fenótipos de doenças neuromusculares, consistente com um papel essencial na manutenção da homeostase tecidual e de programas de expressão gênica em células diferenciadas. Como resultado, o ASCC1 é estudado em vias que conectam transcrição, sinalização de dano ao DNA e redes regulatórias responsivas ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ASCC1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ASCC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ASCC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ASCC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ASCC1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ASCC1 para a investigação da sinalização de ASCC1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ASCC1 críticos para a função ASCC1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ASCC1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ASCC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ASCC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ASCC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ASCC1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ASCC1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ASCC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ASCC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.