Plásmido Doble Nickase (h) ARRDC4: sc-406413-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ARRDC4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ARRDC4 (h) y el plásmido de doble nickasa ARRDC4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ARRDC4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ARRDC4 | sc-406413-NIC | 20 µg | $410.00 |
ARRDC4 (arrestin domain containing 4) codifica una proteína adaptadora citosólica de la familia de las α-arrestinas que se une a proteínas de membrana y actúa como interfaz con las vías de tráfico dependientes de ubiquitina. ARRDC4 participa en la endocitosis y la clasificación de carga al reclutar ligasas E3 de ubiquitina de la familia NEDD4, influyendo así en el recambio de receptores y la duración de la señalización. La regulación transcripcional de ARRDC4 se vincula a respuestas al estrés metabólico, incluidos programas relacionados con la hipoxia y los nutrientes, y se ha asociado con la modulación del transporte de glucosa y la homeostasis energética celular. Se han descrito alteraciones en la expresión de ARRDC4 en contextos relevantes para la enfermedad metabólica y la biología del cáncer, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar la adaptación de la señalización y el control de calidad de proteínas de membrana.
ARRDC4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARRDC4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARRDC4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARRDC4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARRDC4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.