ARMCX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407214

概要

ARMCX1（armadillo repeat containing, X-linked 1）は、哺乳類細胞においてミトコンドリアのダイナミクス、輸送、品質管理の協調に関与するとされる、ミトコンドリア関連のアルマジロリピートタンパク質をコードします。ミトコンドリア輸送や融合―分裂バランスに影響する相互作用を介して、ARMCX1は細胞のバイオエネルゲティクス、レドックス恒常性、アポトーシス感受性を左右し得るため、ストレス応答プログラムとの関連が示唆されます。神経細胞などの極性をもつ細胞種では、細胞骨格ネットワークに沿ったオルガネラ分布とそれが細胞生存に与える影響という文脈で、ARMCX1に関連する機構が研究されることが多いです。ARMCX1の発現変動はがんおよび神経生物学のデータセットで報告されており、ARMCX1依存的なミトコンドリア制御が疾患関連表現型にどのように寄与するのかを解明するための機序研究が進められています。

ARMCX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるARMCX1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ARMCX1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ARMCX1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ARMCX1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ARMCX1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ARMCX1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ARMCX1の機能に不可欠なARMCX1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ARMCX1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ARMCX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびARMCX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ARMCX1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ARMCX1 HDRプラスミド（h）および ARMCX1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはARMCX1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のARMCX1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。