ARL15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412313

概要

ARL15（ADPリボシル化因子様GTPアーゼ15）は、細胞内膜輸送やオルガネラ関連シグナル伝達の制御に関与するとされる、ARFファミリーに属する小型GTPアーゼです。これらの過程は、受容体のリサイクリング、エンドソーム動態、区画特異的な脂質ハンドリングに影響します。こうした役割を通じて、ARL15は、小胞輸送や形質膜組成に依存する細胞代謝およびシグナル伝達経路に影響を及ぼし得る位置づけにあります。ヒト遺伝学研究では、ARL15の遺伝子座が、脂肪量やインスリン関連表現型を含む心代謝形質と関連づけられており、代謝恒常性や関連疾患の生物学におけるARL15の検討を後押ししています。そのため、ARL15の発現や活性を手がかりとして、輸送に結び付いたGTPアーゼシグナルが内分泌応答や栄養依存的な細胞プログラムとどのように接続するのかを解析できます。

ARL15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるARL15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ARL15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ARL15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ARL15タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ARL15シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ARL15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ARL15の機能に不可欠なARL15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ARL15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ARL15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびARL15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ARL15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ARL15 HDRプラスミド（h）および ARL15 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはARL15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のARL15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。