Plásmido Doble Nickase (h) ARHGAP21: sc-403424-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ARHGAP21 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ARHGAP21 (h) y el plásmido de doble nickasa ARHGAP21 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ARHGAP21. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ARHGAP21 Anticuerpo (E-10): sc-390145
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ARHGAP21 | sc-403424-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ARHGAP21 | sc-403424-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARHGAP21 codifica una proteína activadora de GTPasas Rho (RhoGAP) que reduce la señalización de la familia Rho al acelerar la hidrólisis de GTP, moldeando así la remodelación del citoesqueleto de actina y la polaridad celular. Mediante la modulación de RhoA y otras GTPasas relacionadas, ARHGAP21 influye en procesos como el tráfico vesicular, la dinámica de adhesión y la migración dirigida, integrando señales de vías asociadas a receptores y a integrinas. Su función reguladora se conecta con redes de señalización más amplias que coordinan el tráfico de membranas con la contractilidad del citoesqueleto. La desregulación de la señalización de las GTPasas Rho se asocia con frecuencia con cambios en la motilidad y fenotipos invasivos en cáncer, así como con defectos en la función vascular y de células inmunitarias, lo que impulsa estudios mecanísticos de ARHGAP21.
ARHGAP21 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ARHGAP21 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ARHGAP21. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ARHGAP21. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ARHGAP21 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.