Aquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419178

概要

Aqp7はアクアポリン7（AQP7）をコードしており、AQP7は水やグリセロールなどの小さな中性溶質の膜輸送を担うアクアグリセロポリンです。マウスの脂肪細胞では、AQP7が脂肪分解（リポリシス）時のグリセロール流出を調節し、グリセロール利用、トリグリセリド貯蔵、ならびに全身のエネルギーバランスに影響します。その活性は、cAMP/PKAにより駆動されるリポリシス経路を含む代謝シグナルプログラムや、より広範な脂質恒常性ネットワークと連動しています。AQP7の発現や機能の変化は、肥満、インスリン抵抗性、肝臓での脂質蓄積に関連する表現型と結び付けられており、代謝疾患モデルにおける機序的な要所（ノード）としての有用性を支持しています。

Aquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAqp7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Aqp7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Aqp7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Aquaporin 7/AQP7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Aquaporin 7/AQP7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Aqp7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Aquaporin 7/AQP7の機能に不可欠なAqp7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Aqp7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Aquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびAquaporin 7/AQP7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Aqp7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Aquaporin 7/AQP7 HDRプラスミド（m）および Aquaporin 7/AQP7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAqp7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAqp7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。