Plasmide Double Nickase (h) AQP10: sc-413807-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) AQP10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide AQP10 Double Nickase (h) et le plasmide AQP10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AQP10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) AQP10 | sc-413807-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) AQP10 | sc-413807-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AQP10 code l’aquaporine-10, un canal membranaire intégral appartenant à la famille des protéines intrinsèques majeures, qui facilite le passage transmembranaire de l’eau et de petits solutés non chargés, dont le glycérol, contribuant ainsi à l’équilibre osmotique et à la gestion des substrats énergétiques cellulaires. Dans les contextes épithéliaux, AQP10 soutient une perméabilité régulée au niveau de la membrane plasmique et participe à des processus liés au transport des fluides, à l’absorption des nutriments et au couplage métabolique via le flux de glycérol. Une expression altérée des aquaporines ou leur mauvaise localisation peut perturber la fonction de barrière et l’homéostasie des solutés, faisant d’AQP10 une cible pertinente pour l’étude de la physiologie épithéliale et des voies métaboliques dépendantes du glycérol. Les recherches sur AQP10 éclairent également les mécanismes reliant la dynamique du transport membranaire à des phénotypes inflammatoires et métaboliques dans des modèles spécifiques de tissus.
AQP10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AQP10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AQP10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AQP10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AQP10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.