APLP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406400

Descripción general

APLP2 (proteína 2 similar al precursor de beta-amiloide) es una glucoproteína transmembrana de tipo I de la familia APP que sufre procesamiento proteolítico y participa en el tráfico de proteínas de membrana, la adhesión celular y la señalización célula–célula. Se localiza en compartimentos secretorios y endocíticos y se ha vinculado con la regulación de la endocitosis, procesos de desarrollo sináptico y neuronal, y vías de proteostasis. APLP2 puede modular las interacciones con componentes de la matriz extracelular y con proteínas adaptadoras intracelulares, influyendo en la organización del citoesqueleto y en el recambio de receptores. La biología alterada de la familia APP, incluida la expresión y el procesamiento de APLP2, se estudia en contextos como la neurobiología y los fenotipos de células cancerosas, donde son relevantes los cambios en adhesión, migración y señalización de supervivencia.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO APLP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen APLP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del APLP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de APLP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína APLP2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en APLP2 para la investigación de la señalización de APLP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de APLP2 críticos para la función de APLP2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de APLP2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido APLP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido APLP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus APLP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR APLP2 (h) y el plásmido HDR APLP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología APLP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana APLP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.