APLP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406400

概要

APLP2（アミロイドβ前駆体様タンパク質2）は、APPファミリーに属するI型膜貫通糖タンパク質で、プロテアーゼによる切断（プロセシング）を受け、膜タンパク質のトラフィッキング、細胞接着、細胞間シグナル伝達に関与します。分泌系およびエンドサイトーシス系の細胞内区画に局在し、エンドサイトーシスの制御、シナプスおよび神経の発生・成熟過程、ならびにプロテオスタシス（タンパク質恒常性）経路の調節との関連が示されています。APLP2は、細胞外マトリックス成分や細胞内アダプタータンパク質との相互作用を調整し、細胞骨格の構築や受容体のターンオーバーに影響を与えます。APLP2の発現やプロセシングを含むAPPファミリーの生物学的変化は、接着、遊走、生存シグナルの変化が重要となる神経科学やがん細胞表現型などの文脈で研究されています。

APLP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるAPLP2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、APLP2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、APLP2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、APLP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、APLP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、APLP2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• APLP2の機能に不可欠なAPLP2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、APLP2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• APLP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAPLP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、APLP2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  APLP2 HDRプラスミド（h）および APLP2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAPLP2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAPLP2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。