Plásmido Doble Nickase (h) ANO6: sc-402736-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ANO6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ANO6 (h) y el plásmido de doble nickasa ANO6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ANO6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ANO6 | sc-402736-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ANO6 | sc-402736-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ANO6 (anoctamina 6, TMEM16F) codifica una escramblasa de fosfolípidos y un canal iónico activados por Ca2+ que regulan el movimiento bidireccional de fosfolípidos a través de la membrana plasmática. Al acoplar la señalización por calcio con la asimetría lipídica de la membrana, ANO6 favorece la externalización de fosfatidilserina, la liberación de micropartículas y la remodelación de la membrana plasmática durante la activación plaquetaria y otras respuestas al estrés. Estas actividades se intersecan con las vías de coagulación y apoptosis e influyen en la función de las células inmunitarias mediante efectos sobre la dinámica de la membrana y los complejos de señalización. La disfunción de ANO6 se ha relacionado con defectos en la hemostasia, alteraciones en la señalización de muerte celular y fenotipos de inestabilidad de membrana relevantes para la investigación en biología de la sangre, del sistema inmunitario y del cáncer.
ANO6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ANO6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ANO6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ANO6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ANO6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.