ANKRD22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424577

概要

Ankrd22 は、タンパク質間相互作用に関与し、細胞シグナル伝達やストレス適応プログラムに影響を与え得る、アンキリンリピート含有タンパク質 ANKRD22 をコードします。発現プロファイリング研究では、ANKRD22 が代謝状態や組織特異的な制御と関連づけられており、エネルギーバランスを成長・生存シグナルと協調させる経路における役割が示唆されています。哺乳類では、アンキリンリピートタンパク質はしばしばユビキチン依存的なタンパク質分解、細胞骨格の構築、転写制御と相互に関わるため、Ankrd22 は文脈依存的な制御ネットワークを解明するうえで重要な標的となります。ANKRD22 の発現変化は疾患関連データセットでも報告されており、in vivo および細胞モデルにおいて、代謝異常や増殖シグナルの破綻を機序的に検討するための分子ノードとしての有用性が支持されています。

ANKRD22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAnkrd22遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ankrd22内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ankrd22のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ANKRD22タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ANKRD22シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ankrd22欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ANKRD22の機能に不可欠なAnkrd22エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ankrd22ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ANKRD22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびANKRD22 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ankrd22遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ANKRD22 HDRプラスミド（m）および ANKRD22 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAnkrd22ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAnkrd22標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。