Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Amylase 2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400533
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Amylase 2a O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Amylase 2a, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Amylase 2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400533 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
AMY2A codifica a α-amilase pancreática 2A, uma hidrolase secretada que inicia a degradação do amido e do glicogénio da dieta ao clivar ligações glicosídicas α-1,4, gerando maltose e oligossacarídeos. Como parte do programa enzimático do pâncreas exócrino, a amilase 2a contribui para o metabolismo digestivo e é regulada no âmbito da diferenciação das células acinares e de processos da via secretora, incluindo o tráfego RE/Golgi e a libertação de enzimas acoplada a estímulos. Alterações na expressão ou atividade da amilase são usadas como indicador molecular da função exócrina pancreática e são frequentemente investigadas em contextos de inflamação do pâncreas e de perturbações pancreáticas em que a homeostase das células acinares está comprometida. AMY2A também serve como marcador em estudos de identidade de células acinares, respostas ao stress e regulação de genes de enzimas digestivas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Amylase 2a (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene AMY2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do AMY2A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do AMY2A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Amylase 2a.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de AMY2A para a investigação da sinalização de Amylase 2a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) AMY2A críticos para a função Amylase 2a
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos AMY2A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Amylase 2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Amylase 2a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus AMY2A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Amylase 2a Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Amylase 2a (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia AMY2A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo AMY2A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.