AMBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419097

概要

AmbpはAMBP前駆体タンパク質をコードしており、これはタンパク質分解によってプロセシングされ、α1-ミクログロブリンおよびインターα-トリプシンインヒビター・ヘビーチェーン4（ITIH4）を産生します。α1-ミクログロブリンはヘム結合能を持つレドックス活性スカベンジャーとして機能し、酸化ストレスおよびカルボニルストレスの抑制に寄与します。一方、ITIH4は細胞外マトリックスの動態や急性期炎症応答と関連しています。マウスの生物学では、AMBP由来産物は全身性ストレスシグナル、肝臓に富む分泌タンパク質ネットワーク、ならびにプロテアーゼ／炎症に連動したリモデリングの文脈で研究されることが一般的です。これらの経路の破綻は、臨床的転帰を示唆することなく、炎症、組織障害、酸化ストレス関連表現型に関する研究と関連します。

AMBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAmbp遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ambp内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ambpのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、AMBPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、AMBPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ambp欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• AMBPの機能に不可欠なAmbpエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ambpゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• AMBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびAMBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ambp遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  AMBP HDRプラスミド（m）および AMBP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAmbpホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAmbp標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。