alpha Synuclein Lentiviral Activation Particles (h): sc-417273-LAC

SNCA kodiert das humane Alpha-Synuclein, ein präsynaptisches Protein, das an der Steuerung des synaptischen Vesikeltransports, der Neurotransmitterfreisetzung und der aktivitätsabhängigen Plastizität beteiligt ist. Alpha-Synuclein assoziiert mit Lipidmembranen und kann die Dynamik von Vesikel-Andocken und -Fusion beeinflussen, wodurch es mit Signalwegen verknüpft ist, die Proteostase, endolysosomale Verarbeitung und Autophagie regulieren. Eine Fehlregulation der SNCA-Expression oder des Konformationszustands steht in engem Zusammenhang mit der Lewy-Körperchen-Pathologie sowie neurodegenerativen Mechanismen, die mitochondrialen Stress, oxidative Schäden und Neuroinflammation umfassen. Diese Eigenschaften machen SNCA zu einem häufig genutzten Ziel für die Modellierung neuronaler Vulnerabilität, proteotoxischer Stressantworten und schaltkreisweiter Störungen in zellulären Systemen.

alpha Synuclein Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SNCA-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

alpha Synuclein Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SNCA-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen alpha Synuclein-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SNCA-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.