Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plásmido Doble Nickase (m) alpha Synuclein: sc-423051-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)alpha Synuclein consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa alpha Synuclein (m) y el plásmido de doble nickasa alpha Synuclein (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Snca. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: alpha Synuclein Anticuerpo (2B2D1): sc-53955
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) alpha Synuclein | sc-423051-NIC | 20 µg | $410.00 |
Snca codifica la alfa-sinucleína de ratón, una proteína presináptica implicada en el tráfico de vesículas sinápticas, el ensamblaje del complejo SNARE y la regulación de la liberación de neurotransmisores. Se asocia con membranas lipídicas y puede influir en la dinámica de los reservorios de vesículas, la endocitosis y las vías de proteostasis, incluidos los sistemas ubiquitina–proteasoma y autofagia–lisosoma. La alteración de la homeostasis y la agregación de la alfa-sinucleína son elementos centrales en los mecanismos de neurodegeneración, lo que vincula a Snca con respuestas al estrés neuronal, disfunción mitocondrial y señalización inflamatoria. Por ello, Snca se utiliza ampliamente para modelar eventos moleculares relevantes para las sinucleinopatías y para investigar las vías neuronales y gliales que determinan el malplegamiento y la eliminación de proteínas.
alpha Synuclein El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Snca en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Snca. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Snca. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Snca alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.