Aldolase C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400988

Visão geral

ALDOC codifica a aldolase C, uma isoenzima de aldolase frutose-bisfosfato que catalisa uma etapa reversível fundamental na glicólise e na gliconeogénese, convertendo frutose 1,6-bisfosfato em gliceraldeído 3-fosfato e fosfato de di-hidroxiacetona. Nos tecidos humanos, o ALDOC é particularmente abundante no sistema nervoso central e contribui para o metabolismo energético neuronal, acoplando o fluxo glicolítico ao equilíbrio redox e às necessidades biossintéticas. Para além do seu papel metabólico, a aldolase C tem sido associada à regulação da organização do citoesqueleto e das respostas ao stress celular através de redes de sinalização sensíveis a metabolitos. Alterações na expressão ou na atividade de ALDOC são frequentemente estudadas no contexto da vulnerabilidade neurológica e da reprogramação metabólica observadas em diversos estados patológicos, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para a investigação de vias em modelos celulares e de tecidos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aldolase C (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ALDOC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ALDOC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ALDOC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aldolase C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ALDOC para a investigação da sinalização de Aldolase C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ALDOC críticos para a função Aldolase C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ALDOC para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aldolase C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Aldolase C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ALDOC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aldolase C Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Aldolase C (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ALDOC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ALDOC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.