Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406326

Visão geral

O gene humano **ALDH8A1** codifica a **aldeído desidrogenase 8-A1**, uma enzima dependente de **NAD(P)+** que oxida aldeídos reativos aos seus ácidos correspondentes, contribuindo para a desintoxicação celular de aldeídos e para a homeostase redox. A atividade de **ALDH8A1** se cruza com vias metabólicas que lidam com aldeídos derivados da peroxidação lipídica e com respostas mais amplas ao estresse carbonílico, ajudando a limitar a formação de adutos em proteínas e DNA mediada por aldeídos. A desregulação de enzimas da família das aldeído desidrogenases está associada a alterações na tolerância ao estresse oxidativo, reprogramação metabólica e maior vulnerabilidade a danos por eletrófilos em múltiplos contextos de doença. Na pesquisa biomédica, **ALDH8A1** é estudada por seu impacto no metabolismo mitocondrial e citosólico, na sinalização de estresse e na aptidão celular em condições que elevam a carga endógena de aldeídos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ALDH8A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ALDH8A1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ALDH8A1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ALDH8A1 para a investigação da sinalização de Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ALDH8A1 críticos para a função Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ALDH8A1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ALDH8A1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Aldehyde dehydrogenase 8-A1/ALDH8A1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ALDH8A1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ALDH8A1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.