Plasmide Double Nickase (m) Ah Receptor: sc-419054-NIC

Le gène murin **Ahr** code le récepteur des hydrocarbures aromatiques (AhR), un facteur de transcription activé par des ligands qui détecte les xénobiotiques et des métabolites endogènes afin de réguler des programmes d’expression génique impliqués dans la détoxification et les tissus barrières. Après activation, AhR se transloque dans le noyau, dimérise avec ARNT et se lie aux éléments de réponse aux xénobiotiques pour induire des cibles telles que les enzymes du cytochrome P450, en intégrant des interactions avec NF-κB, Wnt/β-caténine et d’autres voies inflammatoires et métaboliques. La signalisation d’AhR module l’homéostasie épithéliale, la fonction des cellules présentatrices d’antigènes et la différenciation des lymphocytes T, façonnant l’immunité des muqueuses et les réponses aux signaux environnementaux. Une activité d’**Ahr** dérégulée a été impliquée dans la sensibilité aux toxiques, des phénotypes inflammatoires et la biologie tumorale, ce qui en fait une cible largement utilisée pour des études mécanistiques des interactions gène–environnement.

Ah Receptor Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ahr dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ahr. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ahr. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ahr.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.