aggrecan CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419039

개요

Acan은 연골 세포외기질의 주요 콘드로이틴 황산 프로테오글리칸인 아그리칸(aggrecan)을 암호화하며, 아그리칸은 히알루로난과 링크 단백질과 함께 큰 응집체를 형성해 압박(압축) 탄성을 제공합니다. 아그리칸의 합성, 분비, 기질 조립은 연골세포 분화와 성장판 성숙의 핵심 과정으로, TGF-β, BMP 및 염증성 사이토카인 신호에 의해 영향을 받는 연골 항상성 프로그램과 연동됩니다. ADAMTS 계열 아그리칸분해효소(aggrecanase)와 기질 금속단백분해효소(MMP)에 의한 아그리칸의 단백질분해 절단은 세포외기질 재형성과 연골 무결성 저하에 기여합니다. 아그리칸 대사의 이상 조절과 Acan 발현 감소는 골격 이형성증 표현형 및 퇴행성 관절 과정과 연관되어 있어, Acan은 마우스 모델에서 근골격계 및 연골 생물학 연구의 핵심 표적으로 여겨집니다.

aggrecan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Acan 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Acan 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Acan의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 aggrecan 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 aggrecan 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Acan 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• aggrecan 기능에 중요한 Acan 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Acan 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• aggrecan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 aggrecan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Acan 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  aggrecan HDR 플라스미드 (m) 및 aggrecan HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Acan 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Acan 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.