ADM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403726

概要

ADM2（アドレノメデュリン2；別名インターメジン）は、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（CGRP）ファミリーに属する分泌性ペプチドホルモンをコードしており、CLR（CALCRL）にRAMP共受容体が結合した受容体複合体を介してシグナルを伝達し、cAMP/PKA依存性の応答を調節します。ADM2は、血管トーヌスの調節、内皮細胞および平滑筋細胞の機能、体液・電解質恒常性、ならびに心血管・腎生理におけるストレス応答性シグナル伝達に寄与します。細胞レベルでは、ADM2は血管新生プログラム、一酸化窒素（NO）関連経路、炎症メディエーターのバランスに影響し、パラクリン／オートクリンのシグナルをGPCRシグナル伝達と統合します。ADM2シグナルの破綻は、文献上、心代謝および血管機能障害と関連づけられており、心血管・腎・免疫代謝研究モデルにおける機序解明研究に有用です。

ADM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADM2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADM2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADM2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADM2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADM2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADM2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADM2の機能に不可欠なADM2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADM2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびADM2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADM2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADM2 HDRプラスミド（h）および ADM2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADM2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADM2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。