ADM2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403726

Übersicht

ADM2 (Adrenomedullin 2; auch als Intermedin bekannt) kodiert ein sezerniertes Peptidhormon aus der Familie des Calcitonin-Gen-verwandten Peptids, das über CLR (CALCRL) zusammen mit RAMP-Korezeptoren signalisiert, um cAMP/PKA-abhängige Antworten zu modulieren. ADM2 trägt zur Regulation des Gefäßtonus, zur Funktion von Endothel- und glatten Muskelzellen, zur Flüssigkeits- und Elektrolythomöostase sowie zu stressresponsiver Signalübertragung in der kardiovaskulären und renalen Physiologie bei. In zellulären Kontexten kann ADM2 angiogene Programme, Stickstoffmonoxid-gekoppelte Signalwege und das Gleichgewicht inflammatorischer Mediatoren beeinflussen und dabei parakrine/autokrine Signale mit der GPCR-Signalgebung integrieren. Eine dysregulierte ADM2-Signalübertragung wurde in der Literatur mit kardiometabolischer und vaskulärer Dysfunktion in Verbindung gebracht, was ADM2 für mechanistische Studien in kardiovaskulären, renalen und immunmetabolischen Forschungsmodellen relevant macht.

Das ADM2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ADM2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ADM2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ADM2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ADM2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ADM2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ADM2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ADM2-Exone abzielen, die für die ADM2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ADM2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ADM2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ADM2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ADM2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ADM2 HDR-Plasmid (h) und ADM2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ADM2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ADM2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.