ADH7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-419006-KO-2

概要

Adh7はアルコール脱水素酵素7（ADH7）をコードしており、NAD依存性酸化還元酵素としてレチノイド代謝および多様なアルコール／アルデヒド基質の代謝に関与し、細胞のレドックスバランスや解毒能に影響を及ぼします。マウスにおいてAdh7が発現する組織では、ADH7活性がレチノールからレチナールへの変換段階（レチノイン酸シグナル伝達へとつながる過程）と交差し得ます。レチノイン酸シグナルは分化プログラムや上皮の恒常性維持において中心的な経路です。アルデヒド処理やレチノイド代謝の変化は、酸化ストレス応答や増殖制御の破綻と関連づけられることが多く、Adh7は組織リモデリングや疾患関連表現型に対する代謝的寄与を検討するうえで有用なノードとなります。さらに、アルコール／アルデヒド代謝は脂質シグナルや炎症シグナルにも影響するため、Adh7の摂動を利用して、代謝酵素とレチノイド制御ネットワーク下流の転写プログラムとのクロストークを解析できます。

ADH7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるAdh7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adh7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Adh7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADH7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADH7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adh7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADH7の機能に不可欠なAdh7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Adh7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADH7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびADH7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adh7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADH7 HDRプラスミド（m）および ADH7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdh7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdh7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。