Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406817

概要

ADCY9はアデニル酸シクラーゼ9（AC9）をコードしており、ATPを環状AMP（cAMP）に変換する膜結合型酵素である。cAMPはGPCR（Gタンパク質共役受容体）駆動性シグナル伝達における中核的なセカンドメッセンジャー入力を担う。AC9依存的なcAMP動態は、PKAおよびEPACを介したリン酸化ネットワークを調節し、転写プログラム、イオンチャネル活性、さらに代謝調節や炎症シグナルなどの細胞種特異的応答を形成する。アデニリルシクラーゼファミリーの一員として、AC9は区画化されたcAMPマイクロドメインの形成に寄与し、受容体の脱感作やシグナルカスケードのフィードバック制御に影響を与える。cAMP経路の破綻は心代謝、神経生物学、免疫関連の疾患機序に関与するとされており、ADCY9は経路マッピングや遺伝子型—表現型研究に有用な標的となる。

Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるADCY9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADCY9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADCY9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADCY9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9の機能に不可欠なADCY9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADCY9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAdenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADCY9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 HDRプラスミド（h）および Adenylate cyclase 9/AC9/ADCY9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADCY9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADCY9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。