Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2): sc-400407-KO-2

概要

ADCY3はアデニル酸シクラーゼ3（AC3）をコードしており、ATPを環状AMP（cAMP）に変換する膜結合型酵素です。これにより、多様なGタンパク質共役型受容体（GPCR）の下流におけるセカンドメッセンジャーシグナル伝達を形成します。AC3は細胞内cAMP濃度を調節することで、転写プログラム、イオンチャネル活性、細胞の代謝応答を制御するPKAおよびEPAC依存性経路に影響を与えます。AC3は感覚系や神経内分泌の文脈で特によく研究されており、刺激—応答のカップリングを微調整するcAMPマイクロドメインシグナル伝達にも寄与します。遺伝学的および機能的な証拠から、ADCY3関連シグナルが代謝表現型や神経行動学的特性と結び付くことが示されており、ヒト細胞におけるcAMP駆動性制御の機序研究において重要な対象となっています。

Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）は、human細胞株におけるADCY3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ADCY3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ADCY3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ADCY3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3の機能に不可欠なADCY3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ADCY3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびAdenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ADCY3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 HDRプラスミド（h）および Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはADCY3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のADCY3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。