Plásmido Doble Nickase (h) Adenosine A3-R: sc-402007-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Adenosine A3-R consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Adenosine A3-R (h) y el plásmido de doble nickasa Adenosine A3-R (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ADORA3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Adenosine A3-R | sc-402007-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Adenosine A3-R | sc-402007-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADORA3 codifica el receptor humano de adenosina A3 (A3-R), un GPCR acoplado a Gi/o que detecta la adenosina extracelular y modula los niveles intracelulares de AMPc, a la vez que activa señales dependientes de MAPK/ERK, PI3K–AKT y PLC. La actividad de A3-R determina la quimiotaxis y las funciones efectoras en células inmunitarias, influye en respuestas vasculares y epiteliales y puede afectar programas de supervivencia celular bajo hipoxia o estrés inflamatorio, donde la adenosina se acumula. A través de estas vías, ADORA3 se estudia con frecuencia en contextos como la inflamación, la fibrosis, la señalización relacionada con la isquemia y la biología del microambiente tumoral, donde la señalización purinérgica contribuye a la regulación inmunitaria y a la adaptación al estrés.
Adenosine A3-R El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ADORA3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ADORA3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ADORA3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ADORA3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.