ADAM11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418982

概要

Adam11は、酵素活性を持たないADAMファミリーのディスインテグリン様タンパク質であるADAM11をコードしており、細胞—細胞間および細胞—細胞外マトリックス間相互作用に関与し、特に神経系で重要な役割を担っています。ADAM11は、その細胞外ドメインを介して、神経細胞の分化、シナプス構築、ならびに接着依存的シグナル伝達の調節といったプロセスに関連します。ADAM11の発現変動やゲノム変化は、神経発生および神経変性の表現型に関する研究で報告されており、接着や移動に関わるプログラムが破綻する腫瘍生物学の文脈でも検討されています。マウス遺伝子としてのAdam11は、神経回路や組織リモデリングにおける、保存されたADAM介在メカニズムを解明するための扱いやすいモデル系を提供します。

ADAM11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAdam11遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adam11内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Adam11のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ADAM11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ADAM11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adam11欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ADAM11の機能に不可欠なAdam11エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Adam11ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ADAM11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびADAM11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adam11遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ADAM11 HDRプラスミド（m）および ADAM11 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdam11ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdam11標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。