ACTR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-426328

概要

Actr6は、核内のアクチン関連因子であるアクチン関連タンパク質6（ACTR6）をコードしており、クロマチン制御複合体の一員としてヌクレオソーム再構成と転写制御を支えます。ACTR6の活性はプロモーターやエンハンサーの構造形成に寄与し、複製ストレス応答やDNA損傷修復などの過程におけるDNAアクセス性に影響を与えます。クロマチン動態への作用を介して、Actr6は細胞周期の進行、系譜（分化）決定、ゲノム安定性維持プログラムを調節し得ます。クロマチン再構成の破綻は発生異常やがん性の転写状態と広く関連しているため、Actr6は疾患関連のエピジェネティック機構を研究するうえで有用な標的（ノード）となります。

ACTR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるActr6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Actr6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Actr6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACTR6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACTR6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Actr6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACTR6の機能に不可欠なActr6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Actr6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACTR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびACTR6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Actr6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACTR6 HDRプラスミド（m）および ACTR6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはActr6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のActr6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。