ACTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418964
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTA1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACTA1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418964 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acta1 codifica ACTA1, a isoforma predominante de α-actina sarcomérica no músculo esquelético, onde polimeriza em filamentos finos que se ancoram aos discos Z e permitem a contração baseada em actomiosina. A ACTA1 integra a organização estrutural do citoesqueleto com a sinalização contrátil regulada por cálcio, sustentando a miofibrilogênese, a manutenção do sarcômero e a transmissão de força mecânica. Alterações na função de ACTA1 perturbam a integridade e a contratilidade das fibras musculares e estão associadas a miopatias congênitas, tornando-a um nó central para o estudo de defeitos de montagem do sarcômero e de mecanismos de degeneração muscular in vivo e in vitro. Em sistemas murinos, Acta1 funciona como um marcador-chave e determinante funcional da diferenciação do músculo esquelético, da remodelação do tipo de fibra e das respostas ao estresse por carga mecânica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACTA1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acta1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acta1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acta1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACTA1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acta1 para a investigação da sinalização de ACTA1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acta1 críticos para a função ACTA1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acta1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acta1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACTA1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACTA1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acta1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acta1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.