ACAD-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432841

概要

Acad9は、脂肪酸β酸化を支えるミトコンドリアのフラボタンパク質であるアシルCoAデヒドロゲナーゼファミリー9（ACAD-9）をコードしており、酸化的リン酸化複合体Iの効率的な組み立てにも必須です。ミトコンドリアでの電子伝達とエネルギー代謝における役割を通じて、ACAD-9はレドックス恒常性、ATP産生、ならびに需要の高い組織における代謝柔軟性に影響します。ACAD9機能の破綻は、複合体I組み立て不全やミトコンドリア脳筋症様の表現型と関連しており、マウスモデルにおける生体エネルギー破綻、代謝ストレス応答、ミトコンドリア疾患メカニズムの研究に有用です。

ACAD-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAcad9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Acad9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Acad9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACAD-9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACAD-9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Acad9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACAD-9の機能に不可欠なAcad9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Acad9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACAD-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびACAD-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Acad9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACAD-9 HDRプラスミド（m）および ACAD-9 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAcad9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAcad9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。