Plásmido Doble Nickase (h) A-FABP: sc-400756-NIC

FABP4 codifica la proteína de unión a ácidos grasos del adipocito (A-FABP), una chaperona lipídica citosólica que se une a ácidos grasos de cadena larga y regula su transporte hacia vías metabólicas y de señalización. En adipocitos y macrófagos humanos, A-FABP integra el manejo de lípidos con programas transcripcionales que involucran la señalización de PPAR, la expresión de genes inflamatorios y las respuestas al estrés celular, conectando el estado nutricional con fenotipos inmunometabólicos. La alteración de la expresión de FABP4 se ha asociado con adipogénesis desregulada, sensibilidad a la insulina y activación de macrófagos, lo que la convierte en un marcador ampliamente utilizado y en un nodo mecanístico en estudios de inflamación relacionada con la obesidad y disfunción cardiometabólica. Como modulador de la señalización mediada por lípidos, A-FABP también es relevante para analizar la comunicación cruzada entre el metabolismo lipídico, la producción de citocinas y los estados de diferenciación celular.

A-FABP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FABP4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FABP4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FABP4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FABP4 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.