μ-protocadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406015
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- μ-protocadherin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico μ-protocadherin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:µ-protocadherin Anticorpo (A-11): sc-166953
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
μ-protocadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406015 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDHR5 codifica a μ-protocaderina, uma molécula de adesão célula–célula dependente de cálcio, enriquecida em tecidos epiteliais, onde contribui para a organização das junções apicais, a manutenção da polaridade e a integridade da barreira. Por meio de interações homofílicas e da ligação a complexos citoesqueléticos e juncionais, a μ-protocaderina ajuda a coordenar a morfogênese epitelial e a sinalização dependente de contato que influencia a diferenciação e a arquitetura tecidual. Alterações na expressão de CDHR5 têm sido associadas ao remodelamento epitelial e a programas de adesão desregulados observados em patologias gastrointestinais e outras doenças epiteliais. Como receptor de adesão de superfície, CDHR5 é frequentemente investigado em estudos sobre estabilidade das junções, plasticidade epitelial e fenótipos dependentes do microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO μ-protocadherin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDHR5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDHR5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDHR5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína μ-protocadherin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDHR5 para a investigação da sinalização de μ-protocadherin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDHR5 críticos para a função μ-protocadherin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDHR5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo μ-protocadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo μ-protocadherin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDHR5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo μ-protocadherin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR μ-protocadherin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDHR5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDHR5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.