μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406015

概要

CDHR5は、カルシウム依存性の細胞間接着分子であるμ-プロトカドヘリンをコードしており、上皮組織に豊富に発現しています。上皮においてμ-プロトカドヘリンは、頂端部接着構造の組織化、極性の維持、ならびにバリア機能の保全に寄与します。μ-プロトカドヘリンは、同種分子間相互作用（ホモフィリック相互作用）と細胞骨格・接着複合体への連結を介して、上皮の形態形成や、分化および組織構築に影響を与える接触依存性シグナル伝達の協調に関与します。CDHR5の発現変化は、消化管をはじめとする上皮性疾患で認められる上皮リモデリングや接着プログラムの破綻と関連づけられています。表面接着受容体として、CDHR5は接着結合の安定性、上皮の可塑性、そして微小環境依存的な表現型に関する研究でしばしば解析対象となります。

μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDHR5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDHR5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDHR5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、μ-protocadherinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、μ-protocadherinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDHR5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• μ-protocadherinの機能に不可欠なCDHR5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDHR5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびμ-protocadherin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDHR5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  μ-protocadherin HDRプラスミド（h）および μ-protocadherin HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDHR5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDHR5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。