α_2C-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419025

概要

Adra2c は、マウスの α2C-AR（カテコールアミンに応答する抑制性の G タンパク質共役受容体）をコードしており、主に Gi/Go と共役してアデニル酸シクラーゼ活性を抑制し、cAMP/PKA シグナル伝達を低下させ、イオンチャネル機能を調節します。シナプス前終末での神経伝達物質放出や交感神経出力の制御を通じて、α2C-AR はシナプス伝達、血管トーン、ストレス応答性の神経内分泌シグナルに影響を与えます。受容体の活性化は、βγ サブユニット依存性の経路を介して MAPK/ERK シグナルや細胞興奮性にも作用し得ます。ADRA2C が関与するアドレナリン作動性シグナルの破綻は、神経精神疾患様の表現型や心血管系の過程と関連づけられており、本遺伝子は自律神経調節および神経回路機能の研究において重要です。

α2C-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAdra2c遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Adra2c内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Adra2cのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、α2C-ARタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、α2C-ARシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Adra2c欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• α2C-ARの機能に不可欠なAdra2cエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Adra2cゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• α2C-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびα2C-AR CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Adra2c遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  α2C-AR HDRプラスミド（m）および α2C-AR HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAdra2cホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAdra2c標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。