Plásmido Doble Nickase (h) α2A-AR: sc-401545-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)α2A-AR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa α2A-AR (h) y el plásmido de doble nickasa α2A-AR (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ADRA2A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) α2A-AR | sc-401545-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) α2A-AR | sc-401545-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ADRA2A codifica el receptor adrenérgico humano α2A (α2A-AR), un GPCR acoplado a Gi/o que modula la liberación de neurotransmisores y el tono simpático al inhibir la adenilil ciclasa, reducir el AMPc intracelular y regular la actividad de los canales de Ca2+ y K+. La señalización de α2A-AR se integra con las vías MAPK/ERK y las vías vinculadas a PLC para modular la transmisión sináptica, la reactividad vascular y las respuestas secretoras endocrinas de manera dependiente del tipo celular. La desregulación de la expresión de ADRA2A o de la señalización del receptor se ha estudiado en el contexto de fenotipos neuropsiquiátricos, la fisiología autonómica y cardiovascular, y rasgos metabólicos, incluida la dinámica de secreción de insulina.
α2A-AR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ADRA2A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ADRA2A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ADRA2A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ADRA2A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.