9230105E10Rik アクチベーター

一般的な9230105E10Rik活性化剤としては、フォルスコリンCAS 66575-29-9、IBMX CAS 28822-58-4、PMA CAS 16561-29-8、イオノマイシンCAS 56092-82-1、(-)-エピガロカテキンガレートCAS 989-51-5が挙げられるが、これらに限定されない。

9230105E10Rikアクチベーターという名称は、9230105E10Rik遺伝子の活性を誘導することができる化学物質のクラスを包含する。このような活性化物質の同定は、一般にハイスループットスクリーニング（HTS）戦略、すなわち遺伝子活性を調節する能力について膨大な化合物ライブラリーの評価を可能にする方法論的アプローチから始まる。9230105E10Rik活性化因子の場合、レポーター遺伝子アッセイが一般的に採用される。これは、容易に測定可能なレポーター遺伝子（通常、蛍光または発光を発するタンパク質をコードする）を、9230105E10Rik遺伝子プロモーターの制御下に置く系を工学的に構築することを含む。このコンストラクトを含む細胞を様々な化学化合物に暴露すると、プロモーターを活性化するものがレポーター遺伝子の発現の上昇を引き起こし、これを検出し定量することができる。レポーター活性の顕著な上昇を引き起こす化合物は、9230105E10Rik遺伝子の潜在的な活性化因子としてマークされる。これらのプライマリーヒットは、活性化効果を確認するために、さらなる検証のために選択される。

ハイスループットスクリーニングのフォローアップでは、定量的PCR（qPCR）を用いて、候補活性化因子による9230105E10Rik遺伝子のアップレギュレーションを確認・定量する。この手法では、化合物との相互作用後に9230105E10Rik遺伝子から転写されるmRNAのレベルを測定する。遺伝子のmRNAレベルの増加が観察されたことから、化合物は転写レベルで遺伝子発現を増強できることが示唆された。これらの所見をタンパク質合成と関連付けるために、ウェスタンブロット分析が行われる。この手法では、電気泳動で細胞溶解液からタンパク質を分離し、膜に移し、9230105E10Rikタンパク質に特異的な抗体でプローブする。ウェスタンブロットにおいて、コントロールと比較してタンパク質のバンド強度が検出可能なほど増加していることから、この化合物がmRNAレベルを上昇させるだけでなく、対応するタンパク質の発現を上昇させる能力を持っていることが確認された。これらの分子技術を総合すると、9230105E10Rik遺伝子の活性化因子としての化合物の活性を評価・確認するための強固な枠組みが得られ、観察された効果が、転写からタンパク質産生に至るまで、遺伝子の発現の正真正銘のアップレギュレーションによるものであることが確実になる。