9030612M13Rik アクチベーター

一般的な9030612M13Rik活性化剤には、次のものが含まれるが、これらに限定されない。フォルスコリンCAS 66575-29-9、イオノマイシンCAS 56092-82 -1、PMA CAS 16561-29-8、塩酸イソプロテレノール CAS 51-30-9、ヒスタミン塩基 CAS 51-45-6などがある。

9030612M13Rik活性化剤は、9030612M13Rik遺伝子の活性を高めることができる化学物質のカテゴリーを示す。これらの活性化剤を同定する初期段階には、遺伝子発現を調節する能力について多数の化合物を調べることを容易にする方法であるハイスループットスクリーニング（HTS）を用いる。これはレポーター遺伝子アッセイを用いることで達成され、9030612M13Rik遺伝子のプロモーターの制御下に検出可能なレポーター遺伝子（多くの場合、蛍光または発光タンパク質をコードする）が置かれる。このコンストラクトを保有する細胞が様々な化学物質にさらされると、プロモーターを活性化できる化学物質がレポーター遺伝子の出力を上昇させる。その結果生じる蛍光または発光の増加が定量的に測定される。レポーターのシグナルが一貫して有意に増加する化合物は、9030612M13Rik遺伝子の潜在的な活性化物質とみなされ、その活性を確認するためのより詳細な分析のために選択される。

このプロセスの第二段階は、これらの化合物がmRNAとタンパク質レベルで9030612M13Rik遺伝子をアップレギュレートする能力を検証することである。化合物との相互作用後の9030612M13RikのmRNAレベルを測定するために、定量的PCR（qPCR）が採用される。qPCRによって検出されたmRNAの上昇は転写の上昇を示しており、この化合物が転写レベルで遺伝子発現を増強することが示唆される。これと並行して、mRNAレベルの上昇が9030612M13Rik遺伝子のタンパク質産物の上昇と相関しているかどうかを調べるために、ウェスタンブロット分析が利用される。この技術は、ゲル電気泳動によるタンパク質の分離、膜への転写、9030612M13Rikタンパク質に対する特異的抗体によるプロービングを含む。タンパク質のバンドの強度が対照サンプルと比較して増加すれば、この化合物が実際にタンパク質レベルの増加をもたらすことが確認される。