ZRSR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423571

Descripción general

Zrsr2 codifica ZRSR2, una proteína de unión a ARN con dedos de zinc que actúa como componente central del espliceosoma, con un papel destacado en el reconocimiento y la eliminación de intrones de tipo U12. Mediante la regulación de la fidelidad del empalme (splicing) del pre-ARNm, ZRSR2 influye en la selección de isoformas de transcritos y en la expresión de genes implicados en el control del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés. La alteración de la actividad del espliceosoma menor dependiente de ZRSR2 puede provocar una retención intrónica anómala y defectos generalizados en el procesamiento del ARN, vinculando esta vía con programas hematopoyéticos e inmunitarios alterados en contextos relevantes para la enfermedad. Como factor de splicing conservado, ZRSR2 en ratón es útil para estudios mecanísticos del ensamblaje del espliceosoma, la biología de los intrones menores y la remodelación posterior del proteoma.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZRSR2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zrsr2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zrsr2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zrsr2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZRSR2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zrsr2 para la investigación de la señalización de ZRSR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Zrsr2 críticos para la función de ZRSR2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zrsr2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZRSR2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZRSR2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zrsr2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZRSR2 (m) y el plásmido HDR ZRSR2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zrsr2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zrsr2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.