Plasmide Double Nickase (m) ZIP9: sc-435885-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ZIP9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZIP9 Double Nickase (m) et le plasmide ZIP9 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Slc39a9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ZIP9 | sc-435885-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) ZIP9 | sc-435885-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc39a9 code ZIP9 (SLC39A9), un membre de la famille ZIP des transporteurs d’ions métalliques, qui contribue à l’homéostasie cellulaire du zinc en régulant l’entrée du zinc et sa répartition entre compartiments. En modulant la disponibilité intracellulaire de Zn²⁺, ZIP9 influence des enzymes dépendantes du zinc et des programmes transcriptionnels, reliant l’équilibre des métaux à des processus tels que le trafic membranaire, la signalisation et les réponses au stress. Un transport du zinc dérégulé est largement associé à des altérations de la fonction immunitaire, du contrôle métabolique et de la signalisation proliférative, faisant de Slc39a9 une cible utile pour des études mécanistiques des voies dépendantes des métaux. Dans les modèles murins, la perturbation de ZIP9 permet de disséquer les réseaux sensibles au zinc et leurs phénotypes en aval dans des types cellulaires et tissus pertinents.
ZIP9 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Slc39a9 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Slc39a9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Slc39a9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Slc39a9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.