ZEB Lentiviral Activation Particles (h): sc-400201-LAC

Das humane Gen **ZEB1** kodiert das Zinkfinger‑E‑Box‑bindende Homeobox‑Protein **ZEB**, einen DNA‑bindenden Transkriptionsfaktor, der epitheliale Genprogramme reprimiert und die epithelial‑mesenchymale Transition (EMT) koordiniert. ZEB1 integriert Signale aus Signalwegen wie **TGF‑β/SMAD**, **WNT/β‑Catenin** und **Notch**, remodeliert das Chromatin und verändert Zelladhäsion, Polarität und Motilität durch Regulation von Zielgenen, darunter **CDH1** und weitere Komponenten von Zellkontakten. Über diese Netzwerke trägt ZEB1 zur Linienspezifizierung, zur Entwicklungs‑Patternbildung und zu stressresponsiven Transkriptionsprogrammen bei. Eine fehlregulierte ZEB1‑Aktivität und EMT‑assoziierte Transkriptionszustände werden in zahlreichen Krankheitsmodellen häufig mit Invasion, stammzellähnlichen Phänotypen und Mechanismen der Therapieresistenz in Verbindung gebracht.

ZEB1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ZEB1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ZEB1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ZEB1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ZEB1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ZEB1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.