ZDHHC7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405072

Descripción general

ZDHHC7 codifica una palmitoiltransferasa de la familia DHHC que cataliza la S‑palmitoilación de proteínas sustrato, una modificación lipídica reversible que regula su asociación a membranas, el tráfico intracelular, la estabilidad y la salida de señalización. Al controlar la localización dependiente de palmitoilación de proteínas de señalización y adaptadoras, ZDHHC7 influye en procesos como la señalización proximal a receptores, el transporte vesicular y la organización de microdominios de membrana. La palmitoilación desregulada se ha relacionado con alteraciones en las vías de señalización de crecimiento y supervivencia, la función de células inmunitarias y la fisiología neuronal, lo que convierte a ZDHHC7 en un nodo útil para estudiar redes de lipidación postraduccional en contextos relevantes para la enfermedad. Investigar ZDHHC7 ayuda a definir cómo la dinámica de la palmitoilación moldea el diálogo cruzado entre vías y la proteostasis bajo condiciones de estrés o asociadas a la transformación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZDHHC7 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZDHHC7 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZDHHC7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZDHHC7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZDHHC7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZDHHC7 para la investigación de la señalización de ZDHHC7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ZDHHC7 críticos para la función de ZDHHC7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZDHHC7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZDHHC7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZDHHC7 (h) y el plásmido HDR ZDHHC7 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZDHHC7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZDHHC7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.