ZDHHC7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405072

Panoramica

ZDHHC7 codifica una palmitoiltransferasi della famiglia DHHC che catalizza la S-palmitoilazione delle proteine substrato, una modifica lipidica reversibile che regola l’associazione alla membrana, il traffico intracellulare, la stabilità e l’output di segnalazione. Controllando la localizzazione, dipendente dalla palmitoilazione, di proteine di segnalazione e adattatrici, ZDHHC7 influenza processi quali la segnalazione prossimale al recettore, il trasporto vescicolare e l’organizzazione dei microdomini di membrana. Una palmitoilazione deregolata è stata collegata ad alterazioni della segnalazione di crescita e sopravvivenza, della funzione delle cellule immunitarie e della fisiologia neuronale, rendendo ZDHHC7 un nodo utile per studiare le reti di lipidazione post-traduzionale in contesti rilevanti per la malattia. L’indagine di ZDHHC7 aiuta a definire come le dinamiche della palmitoilazione plasmino il crosstalk tra vie di segnalazione e la proteostasi in condizioni di stress o associate alla trasformazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZDHHC7 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ZDHHC7 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ZDHHC7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ZDHHC7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZDHHC7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ZDHHC7 per lo studio della segnalazione di ZDHHC7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ZDHHC7 critici per la funzione di ZDHHC7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ZDHHC7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ZDHHC7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZDHHC7 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ZDHHC7 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ZDHHC7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ZDHHC7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.