ZBTB5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432923

Descripción general

Zbtb5 codifica ZBTB5, un factor de transcripción con dominios BTB/POZ y dedos de zinc C2H2 que favorece la unión al ADN específica de secuencia y el ensamblaje de complejos reguladores que controlan programas de expresión génica. En células de ratón, los factores de la familia ZBTB suelen vincularse a la represión transcripcional dependiente de la cromatina o a una activación dependiente del contexto mediante el reclutamiento de corre reguladores, moldeando procesos como la progresión del ciclo celular, el compromiso de linaje y la diferenciación celular. Al influir en redes transcripcionales que gobiernan la proliferación y el estado del desarrollo, ZBTB5 es relevante para estudios mecanísticos de la desregulación de la expresión génica observada en la transformación oncogénica y otras patologías asociadas a la transcripción. El análisis funcional de Zbtb5 puede aclarar cómo las proteínas BTB–dedo de zinc integran la actividad de promotores y potenciadores para coordinar vías downstream.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZBTB5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zbtb5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zbtb5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zbtb5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZBTB5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zbtb5 para la investigación de la señalización de ZBTB5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Zbtb5 críticos para la función de ZBTB5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zbtb5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZBTB5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ZBTB5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zbtb5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZBTB5 (m) y el plásmido HDR ZBTB5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zbtb5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zbtb5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.