Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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YY1 Double Nickase Plasmid (m): sc-423752-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das YY1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- YY1 Double-Nickase-Plasmid (m) und YY1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Yy1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: YY1: sc-7341
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
YY1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-423752-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Yy1** kodiert den multifunktionalen Transkriptionsfaktor **YY1**, ein Zinkfinger-DNA-Bindeprotein, das je nach Chromatinkontext sowohl als Transkriptionsaktivator als auch als -repressor wirken kann. YY1 ist an der Kommunikation zwischen Promotoren und Enhancern, an Polycomb-assoziierter Genstilllegung sowie an der Regulation der Transkription durch die RNA-Polymerase II beteiligt und ist damit mit Prozessen wie Zellzykluskontrolle, Differenzierung und Linienfestlegung verknüpft. Durch Interaktionen mit Chromatin-Remodelern und histonmodifizierenden Komplexen beeinflusst YY1 epigenetische Zustände und die Genomorganisation, einschließlich Funktionen in der Enhancer-Aktivität und in dreidimensionalen Chromatin-Schleifen. Eine fehlregulierte YY1-Aktivität wurde mit veränderten Transkriptionsprogrammen in Zusammenhang gebracht, die für Entwicklungsstörungen, Immunregulation und onkogene Signalwege relevant sind, wodurch **Yy1** einen häufig genutzten Ansatzpunkt für mechanistische Studien zur Genregulation darstellt.
YY1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Yy1-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Yy1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Yy1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Yy1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.