Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) XRCC4: sc-430821-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)XRCC4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa XRCC4 (m) y el plásmido de doble nickasa XRCC4 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Xrcc4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: XRCC4 Anticuerpo (G-10): sc-365118
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) XRCC4 | sc-430821-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Xrcc4** codifica XRCC4, una proteína andamiaje central en la vía de unión de extremos no homólogos (NHEJ) que repara roturas de doble cadena del ADN generadas por radiación ionizante, estrés oxidativo y eventos de recombinación programada. XRCC4 forma un complejo funcional con la ligasa de ADN IV e interactúa con XLF/NHEJ1 para alinear y ligar los extremos de ADN rotos, preservando así la estabilidad del genoma y favoreciendo una progresión adecuada del ciclo celular. La alteración de la unión de extremos dependiente de XRCC4 compromete la integridad cromosómica y aumenta la sensibilidad al estrés genotóxico, lo que vincula la función de XRCC4 con mecanismos subyacentes a la inestabilidad genómica asociada al cáncer. **Xrcc4** también es relevante para estudios del desarrollo del sistema inmunitario, ya que NHEJ es necesaria para la recombinación V(D)J y la diversificación de los genes de los receptores de antígeno.
XRCC4 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Xrcc4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Xrcc4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Xrcc4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Xrcc4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.