Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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WSTF Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404237
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- WSTF El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico WSTF, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: WSTF Anticuerpo (G-5): sc-514287
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
WSTF Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404237 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BAZ1B codifica el factor de transcripción del síndrome de Williams (WSTF), una proteína reguladora asociada a la cromatina que actúa como subunidad central de los complejos de remodelación WICH y B-WICH. WSTF coordina el remodelado de nucleosomas con la replicación y la reparación del ADN, contribuyendo a la estabilidad del genoma mediante la regulación de las respuestas al estrés replicativo y la recuperación de horquillas de replicación detenidas. También posee una actividad atípica de tirosina quinasa implicada en la señalización dependiente de fosforilación en la cromatina, conectando el control transcripcional con vías sensibles al daño del ADN. La alteración de la dosis de BAZ1B y la desregulación de programas de cromatina mediados por WSTF se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con defectos transcripcionales y de reparación relevantes para el cáncer, lo que respalda su estudio en la regulación epigenética y la biología de la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO WSTF (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BAZ1B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BAZ1B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BAZ1B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína WSTF.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BAZ1B para la investigación de la señalización de WSTF, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BAZ1B críticos para la función de WSTF
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BAZ1B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido WSTF CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido WSTF CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BAZ1B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR WSTF (h) y el plásmido HDR WSTF (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BAZ1B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BAZ1B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.